流式細(xì)胞檢測技術(shù)是一種對液流中排成單列的細(xì)胞或其它生物微粒(如微球,細(xì)菌,小型模式生物等)逐個進(jìn)行快速定性、定量分析和分選的技術(shù)。該技術(shù)廣泛的運(yùn)用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個方面,涵蓋了細(xì)胞生物學(xué)、免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)、藥理學(xué)、遺傳學(xué)及臨床檢驗(yàn)等領(lǐng)域??蓹z測培養(yǎng)細(xì)胞、組織樣本、分離細(xì)胞等,其檢測結(jié)果以直方圖、二維圖或假三維圖表示,用于檢測免疫表型分析(白血病、淋巴瘤、干細(xì)胞、疾病診斷、藥物評價)、DNA含量及細(xì)胞周期分析、細(xì)胞特異性標(biāo)記物、細(xì)胞凋亡研究、基因轉(zhuǎn)染鑒定等方面。 流式分選可對檢測到的任意感興趣細(xì)胞群進(jìn)行分選,然后進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)研究(如細(xì)胞培養(yǎng)、Western blot、PCR、測序、染色體分析等)。
我國流式細(xì)胞儀的研制和流式細(xì)胞技術(shù)的應(yīng)用歷經(jīng)30多年的發(fā)展,在臨床和科研領(lǐng)域的應(yīng)用都發(fā)揮了非常重要的作用。
1.流式細(xì)胞儀的使用現(xiàn)狀:
流式細(xì)胞儀首先是由科學(xué)研究單位引進(jìn)我國,逐漸進(jìn)入到醫(yī)療系統(tǒng),應(yīng)用于臨床。2011年有學(xué)者就我國流式細(xì)胞儀的應(yīng)用情況做過調(diào)查和統(tǒng)計,單色、雙色、三色及四色熒光標(biāo)記分別占15.4% (53/344)、13.7% (47/344)、54.1%(186/344)及16.3%(56/344),仍以單激光較少熒光通道的儀器為主。
2.流式細(xì)胞檢測技術(shù)應(yīng)用領(lǐng)域的現(xiàn)狀:
目前我國FCM應(yīng)用領(lǐng)域主要集中在下列方面(在此僅列出部分代表項(xiàng)目):(1)免疫學(xué)領(lǐng)域:淋巴細(xì)胞亞群檢測,用以評估機(jī)體的免疫狀態(tài)、輔助疾病如AIDS/HIV的診斷等,是目前各醫(yī)療單位開展和應(yīng)用較為廣泛的項(xiàng)目。
(2)血液學(xué)領(lǐng)域:主要是血液系統(tǒng)疾病的免疫分型及白血病微小殘留病變(minimal residual disease,MRD)監(jiān)測,用于血液系統(tǒng)疾病的診斷、治療評估和復(fù)發(fā)監(jiān)測。FCM的細(xì)胞免疫分型是診斷造血細(xì)胞疾病不可少的重要標(biāo)準(zhǔn)之一,是目前被廣泛接受和認(rèn)可的免疫分型方法。
(3)臨床腫瘤學(xué):主要是DNA倍體和細(xì)胞周期分析,了解細(xì)胞DNA倍體和增殖能力,異常倍體的出現(xiàn)意味著DNA合成的異常,可能是腫瘤或是癌前病變發(fā)生的重要標(biāo)志。
(4)造血干細(xì)胞移植的應(yīng)用:足夠數(shù)量的造血干細(xì)胞是造血干細(xì)胞移植成功的關(guān)鍵因素之一,通過CD34標(biāo)記和細(xì)胞計數(shù)微球同時使用,或者具有計數(shù)功能的流式細(xì)胞儀是鑒定和計數(shù)造血干細(xì)胞的快速、準(zhǔn)確、定量的方法。